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钦州地区猪链球菌的分离鉴定及药敏试验

作者:东森游戏    文章来源:东森娱乐平台原创    点击数:    更新时间:2019-07-30 10:46    

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收集疑似链球菌病的猪用于细菌分离。根据培养特征,染色特性,形态观察和生化试验,鉴定了一株猪链球菌。药敏试验表明,分离株对氨苄青霉素和头孢他啶耐药。万古霉素,头孢氨苄,克林霉素,恩诺沙星对多粘菌素,环丙沙星,卡那霉素敏感,中度敏感,对红霉素和青霉素敏感性低,但土霉素,四环素,强力霉素和复方新诺明具有明显的耐药性。

关键词猪链球菌;隔离和识别;药敏试验;广西钦州

猪链球菌是现代养猪业中的一种严重传染病,主要引起猪脑膜炎,关节炎,心内膜炎和败血症[1]。猪链球菌2型是世界上的优势菌株。 2005年6月至7月,四川省资阳和内江地区2型猪链球菌感染造成了巨大的经济损失,引起了社会的广泛关注[2]。此外,1型和9型是除2型以外的流行株[3-4],也可引起猪的疾病。虽然理论上治疗猪链球菌的药物很多,但随着抗菌药物的广泛使用和临床上药物的不合理使用,致病菌的耐药性也越来越严重[5-6]。在这项研究中,细菌被分离并在区域养猪场怀疑链球菌病的死猪的淋巴结,肺,脾和扁桃体中进行鉴定。对分离株进行药物敏感性试验,以便为疾病提供临床控制。科学依据。

1材料和方法

钦州地区猪链球菌的分离鉴定及药敏试验

1.1试验材料

试验材料为广西钦州某养猪场怀疑由猪链球菌引起的淋巴结,肺,脾和扁桃体仔猪的病理组织。试验试剂为:羊血琼脂平板,羊血琼脂斜面,普通琼脂培养基,营养肉汤,巧克力培养基等,按常规方法制备,贮存于4℃冰箱中;药敏纸是从北京天坛药物中购买的。技术开发公司;细菌微发酵管购自杭州天河微生物试剂有限公司。

1.2细菌分离

将怀疑有链球菌病的具有淋巴,肺,脾和扁桃体的仔猪的病理组织无菌接种在含有8%羊血,巧克力培养基和营养琼脂平板的琼脂平板上,并在37℃下培养。在24小时,观察细菌的生长特征。挑选具有针尖大小,光滑表面,灰白色,圆形,透明和整齐边缘的单个菌落用于革兰氏染色。革兰氏阳性,链状或成对的球形细菌是可疑菌落,接种在葡萄糖肉浸泡液的液体培养基中用于富集培养,并且在37℃纯培养24小时后再次进行革兰氏染色。对于显微镜检查,革兰氏阳性,成对,短链球菌,然后接触酶试验,结果为阴性,即鉴定为猪链球菌,接种于绵羊血琼脂斜面,置于4°C的冰箱中备用。1.3生化试验

将分离的菌株接种到微量生化反应管中,如木糖,麦芽糖,蔗糖,菊粉,乳糖醇,阿拉伯糖,葡萄糖,乳糖,棉子糖等,同时进行mr试验和vp试验,并在37℃下培养。 24小时,观察生化反应特征。

1.4药敏试验

采用纸张扩散方法。将纯化的菌株在营养肉汤中于37℃培养24小时,用无菌生理盐水稀释细菌溶液至浓度约2百万/ml。使用无菌液体拭子提取细菌溶液并均匀涂覆。在营养琼脂平板上,稍微干燥后,将各种抗生素敏感性纸张涂在介质表面,然后轻轻按压纸张中心使其紧密粘附。在37℃下培养24小时后,观察并测量抑制区的直径。 。判断猪链球菌对药敏纸的敏感性标准:抑菌圈直径在15mm以上高灵敏度; 10~15mm的灵敏度适中;低于10mm的灵敏度是低灵敏度;抑制区不敏感。

2结果与分析

2.1培训结果

该分离物在绵羊血琼脂平板上的菌落直径为0.5~1.0mm,灰白色,半透明,表面光滑,圆形和边缘,是α溶血;巧克力培养基上的菌落特征与绵羊血板菌落相似;革兰氏球状细菌,染色阳性,链状或配对;不能在正常的培养基中生长。

2.2生化检测结果

将分离的菌株接种到每个微生物化学反应管中,同时进行mr试验和vp试验。结果如表1所示。

2.3药敏试验结果

对通过分离培养获得的纯培养物进行药敏试验,结果如表2所示。从表2可以看出,分离菌株对氨苄青霉素,头孢他啶,万古霉素,头孢氨苄,克林霉素,恩诺沙星,中度至多粘菌素,环丙沙星和卡那霉素。对红色素,青霉素敏感,低敏感性(续338页)

它显然对土霉素,四环素,多西环素和复方磺胺甲恶唑具有抗性。

3结论和讨论

从收集的疑似链球菌猪病中分离出一株细菌,根据培养特征,染色特征,形态观察和生化检测鉴定为猪链球菌。药敏试验结果表明,该菌株对氨苄西林,头孢他啶,万古霉素,头孢氨苄,克林霉素和恩诺沙星以及多粘菌素,环丙沙星和卡那霉素均高度敏感。对红霉素和青霉素敏感,对土霉素,四环素,强力霉素和复方磺胺甲恶唑具有明显的耐药性。该菌株具有多重耐药性。

由于近年来各地的吸毒习惯和抗生素的滥用,已经产生了大量的耐药菌株,这对该疾病的后续治疗产生了很大的影响,使得疾病更加困难。控制。因此,建议在临床使用前对该菌株进行药敏试验,并根据检测结果指导药物,并注意穿梭药物,以避免出现耐药菌株。4参考文献

[1] luquei,tarradasc,arenasa,etal.streptococcussuisserotypesassociatedwithdifferentdiseaseconditionsinpigs [j] .vetrec,1998(142): 726-727。

[2]赵华梅,潘秀珍,唐嘉琪。猪链球菌毒力因子及鉴定方法的研究进展[J]。微生物学杂志,2006,26(1): 77-80。

[3]熊毅,刘琦,等。建立猪链球菌亚种和1,2和9四重PCR检测方法[J]。广西农业科学,2007,38(6): 681-684。

[4]付伟,陈金喜,严方芸,等。猪链球菌9型cps9g基因的克隆与序列分析[J]。动物医学进展,2009,30(1): 1-4。

[5]王丽萍,卢承平,唐嘉琪。链球菌对大环内酯类抗生素的耐药性和耐药性[J]。南京农业大学学报,2004,27(4): 81-84。

钦州地区猪链球菌的分离鉴定及药敏试验

[6]严汝谦,赵明军,张志玲,等。河南省致病性猪链球菌血清型及耐药性调查[J]。河南畜牧兽医,2007,28(5): 25-27。




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